酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn) (enzyme linked immunospot assay, ELISpot) 是一種在96孔板內(nèi)的一百萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)對(duì)單個(gè)分泌細(xì)胞進(jìn)行定量檢測(cè)的新型的免疫酶技術(shù)。靈敏度高，易操作，成本相對(duì)流式細(xì)胞術(shù)較低，已被廣泛應(yīng)用于癌癥研究，疾病探索以及疫苗研發(fā)等領(lǐng)域。

         ELISpot原理：將細(xì)胞置于包被有特異性抗體的96孔板中培養(yǎng)，在有刺激的條件下，細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子或免疫球蛋白會(huì)被包被抗體捕獲。移除細(xì)胞后，被捕獲的細(xì)胞因子可進(jìn)一步使用生物素標(biāo)記的二抗來(lái)標(biāo)識(shí)，其后再與酶標(biāo)記的親和素作用，并加入底物使其呈色，有反應(yīng)作用的細(xì)胞會(huì)留下直徑大小不等的染色斑點(diǎn)。

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